Don Juan Tenorio
Es el protagonista de la obra. Es un hombre rico, libertino, temerario, arrogante, hedonista, egocéntrico, seductor y burlador de mujeres. Según su criado, es un hombre franco, noble, muy bravo y extraordinario teniendo en cuenta los tiempos que se viven. En palabras de Buttarelli, es una de las personas más gentiles de España. Por otro lado, Don Gonzalo afirma que es uno de los más viles. Al inicio de la obra, cuenta en su haber setenta y dos conquistas y treinta y dos asesinatos. Se enamora de doña Inés, por quien está dispuesto a cambiar su conducta. No cree en Dios hasta el final de la obra, donde cambia de opinión ante las evidencias que se le presentan.
Don Luis Mejía
Es el antagonista de la obra. Al igual que don Juan, es temerario, vil y gentil, según las distintas opiniones. En el momento del encuentro con Tenorio, al inicio de la obra, ha conquistado cincuenta y seis mujeres y matado veintitrés hombres, en el lapso de un año. Está comprometido con doña Ana de Pantoja. Muere asesinado por don Juan.
Don Gonzalo de Ulloa
Es el comendador de Calatrava, padre de doña Inés. Había acordado con el padre de don Juan que este se casaría con su hija, pero tras enterarse de la conducta de Tenorio, deja sin efecto el trato. Finalmente, es asesinado por don Juan.
Don Diego Tenorio
Es el padre de don Juan. Al enterarse de la maldad de su hijo, lo rechaza y, más tarde, lo deshereda.
Doña Inés de Ulloa
Es la hija de don Gonzalo. Es una novicia del convento Calatravas de Sevilla. Tiene diecisiete años y toda su vida permaneció enclaustrada. No conoce el mundo exterior ni los placeres mundanos. Según la madre abadesa, es cándida y buena. Se enamora apasionadamente de don Juan. Muere luego de que su enamorado huye de España.
Doña Ana de Pantoja
Es la prometida de don Luis Mejía. Pierde su honor a causa de un engaño de don Juan.
Cristófano Buttarelli
Es el dueño de la hostería a la que asisten don Juan y don Luis al comienzo de la obra. Es italiano.
Marcos Ciutti
Es el criado de don Juan. Es oriundo de Génova (Italia). Está muy satisfecho con su trabajo y con el trato que le da don Juan. Es leal a él y cumple todos sus pedidos con gran eficacia.
Brígida
Es la encargada del cuidado de doña Inés. Colabora con don Juan propiciando el encuentro de ambos, a cambio de dinero. Es mentirosa y astuta.
Pascual
Es criado de doña Ana de Pantoja y amigo de don Luis Mejía. Está dispuesto a ayudarlo a entrar a la casa de doña Ana la noche anterior a su casamiento. Es leal.
El capitán Centellas
Es capitán del ejército español. Ha peleado en las guerras de España en Túnez. Es amigo de don Juan, cree que este es insuperable en valentía y en el arte de la seducción, y apuesta por él en la contienda en la que se enfrenta a don Luis.
Don Rafael de Avellaneda
Es amigo de don Juan y de don Luis Mejía. Al inicio de la obra, apuesta a favor del último.
Lucía
Es criada de doña Ana de Pantoja. Colabora con don Juan para que acceda a la casa de su señora, a cambio de dinero.
La abadesa del convento Calatravas de Sevilla
Es la madre superiora del convento de Calatrava en donde está doña Inés. Es rigurosa.
La tornera del convento Calatravas de Sevilla
Es una hermana del convento.
Gastón
Es el criado de don Luis Mejía.
Miguel
Es el ayudante de Buttarelli en la hostería. Habla en italiano.
Escultor
Es el encargado de esculpir las estatuas del panteón en el que están enterradas las víctimas de don Juan. Es un artista habilidoso.
Alguaciles
Son quienes ingresan a la quinta de don Juan y encuentran los cadáveres de don Gonzalo y don Luis Mejía.
Un paje
Es un criado de la casa de don Juan. Está presente en la cena que este comparte con el capitán Centellas y Avellaneda.
La estatua de don Gonzalo
Es la efigie del comendador. Cobra vida para apremiar a don Juan para que limpie su conciencia.
La sombra de doña Inés
Es una sombra que representa a doña Inés, tras su muerte. Insta a don Juan a que se arrepienta de sus pecados y para que alcance, de ese modo, la salvación de su alma.
